慢病毒包裝服務(wù)

慢病毒簡(jiǎn)介

    慢病毒是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種，具有逆轉(zhuǎn)錄病毒的基本結(jié)構(gòu)和特性：整合入宿主細(xì)胞基因組，長期表達(dá)，可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物制備；但也有不同于逆轉(zhuǎn)錄病毒的組份和特性：比逆轉(zhuǎn)錄病毒具有更高的滴度，不僅可以感染分裂期細(xì)胞，更重要的，還能感染非分裂期的細(xì)胞。利用慢病毒載體，可以研究啟動(dòng)子的調(diào)控、過表達(dá)特定基因或沉默特定基因。

慢病毒包裝技術(shù)特點(diǎn)

A. 慢病毒載體的構(gòu)建：

根據(jù)不同的研究需求構(gòu)建慢病毒載體，如用于RNAi的慢病毒載體、用于基因過表達(dá)的慢病毒載體、用于啟動(dòng)子活性研究的慢病毒載體等；

B. 慢病毒包裝過程：

    將重組病毒質(zhì)粒及其輔助包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染至包裝細(xì)胞中，收集富含慢病毒顆粒的細(xì)胞上清液，對(duì)其濃縮后得到高滴度的慢病毒濃縮液，在293T細(xì)胞中測(cè)定并標(biāo)定病毒滴度。

C. 慢病毒包裝結(jié)果：

滴定濃度：1×107～1×108TU/ml

zui終體積：1 ml純化后的病毒液（儲(chǔ)存于PBS）

儲(chǔ)存：批量儲(chǔ)存的*條件為-80°C。

慢病毒包裝用途：

慢病毒載體包裝之后成為假病毒顆粒后，可用于:

· 感染原代細(xì)胞；

· 制備穩(wěn)定表達(dá)/沉默特定基因的單克隆細(xì)胞株；

· in vivo的基因操作；

· 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，特別是轉(zhuǎn)基因大鼠的制備。